„Bouin-Lösung“ – Versionsunterschied
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{{Infobox Chemikalie |
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| Strukturformel = nicht angebbar, da Gemisch |
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| Gemisch = Ja |
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| Andere Namen = Bouin’s fluid |
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Die '''Bouin-Lösung''' (auch ''Bouinsche Lösung'', ''Bouin's fluid'') ist eine Lösung, die in der Histologie zur [[Fixierung (Präparationsmethode)|Fixierung]] verwendet wird.<ref>{{cite book |title=Histotechnology: A Self-Instructional Text |edition=3 |last1=Carson |first1=Freida L. |last2=Hladik |first2=Christa |year=2009 |publisher=American Society for Clinical Pathology Press |location=Hong Kong |isbn=978-0-89189-581-7 |page=19 |url= |accessdate= }}</ref><ref>{{cite book |title=Invertebrate Animals - Collection and Preservation |editor1-first=Roger J. |editor1-last=Lincoln |editor2-first=John Gordon |editor2-last=Sheals |edition=1 |year=1979 |publisher=British Museum (Natural History) |location=UK |isbn=0 521 296773 |page=128 |url= |accessdate=}}</ref> |
Die '''Bouin-Lösung''' (auch ''Bouinsche Lösung'', ''Bouin's fluid'') ist eine Lösung, die in der Histologie zur [[Fixierung (Präparationsmethode)|Fixierung]] verwendet wird.<ref>{{cite book |title=Histotechnology: A Self-Instructional Text |edition=3 |last1=Carson |first1=Freida L. |last2=Hladik |first2=Christa |year=2009 |publisher=American Society for Clinical Pathology Press |location=Hong Kong |isbn=978-0-89189-581-7 |page=19 |url= |accessdate= }}</ref><ref>{{cite book |title=Invertebrate Animals - Collection and Preservation |editor1-first=Roger J. |editor1-last=Lincoln |editor2-first=John Gordon |editor2-last=Sheals |edition=1 |year=1979 |publisher=British Museum (Natural History) |location=UK |isbn=0 521 296773 |page=128 |url= |accessdate=}}</ref> |
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Version vom 27. Mai 2014, 07:14 Uhr
Strukturformel | ||||||||
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nicht angebbar, da Gemisch | ||||||||
Allgemeines | ||||||||
Name | Bouin-Lösung | |||||||
Andere Namen |
Bouin’s fluid | |||||||
Summenformel | nicht angebbar, da Gemisch | |||||||
Externe Identifikatoren/Datenbanken | ||||||||
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Eigenschaften | ||||||||
Molare Masse | nicht angebbar, da Gemisch | |||||||
Aggregatzustand |
flüssig[1] | |||||||
Sicherheitshinweise | ||||||||
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Soweit möglich und gebräuchlich, werden SI-Einheiten verwendet. Wenn nicht anders vermerkt, gelten die angegebenen Daten bei Standardbedingungen (0 °C, 1000 hPa). |
Die Bouin-Lösung (auch Bouinsche Lösung, Bouin's fluid) ist eine Lösung, die in der Histologie zur Fixierung verwendet wird.[2][3]
Eigenschaften
Bouin-Lösung besteht aus Pikrinsäure (gesättigte Lösung, 0,04 Molar), 5 % (V/V) Essigsäure (0,9 Molar) und 10 % (V/V) Formaldehyd in wässriger Lösung. Sie wird unter anderem zur Fixierung von Biopsien des Gastrointestinaltrakts und der Weichgewebe verwendet,[4] da sie anschließend im Vergleich zu neutral gepufferter zehnprozentiger Formaldehydlösung eine kontrastreichere Färbung von Zellkernen erlauben. Die Bouin-Lösung besitzt einen pH-Wert zwischen 1,5 und 2. Sie ist weniger geeignet für Elektronenmikroskopische Präparate. Eine Fixierung mit Bouin-Lösung wird unter anderem vor einer Hämatoxylin-Eosin-Färbung oder einer Trichrom-Färbung verwendet. Bevor einer Trichrom-Färbung werden Formaldehyd-fixierte Gewebe meist mit Bouin-Lösung gebeizt. Die enthaltene Essigsäure lysiert Erythrozyten und löst und cheliert Metallionen von Eisen oder Calcium. Alternativ kann Ameisensäure verwendet werden.[5] Formaldehyd erzeugt ein basophiles Zytosol, was jedoch durch die Pikrinsäure kompensiert wird.
Ungetrocknete Gewebe sollten weniger als 24 Stunden in Bouin-Lösung fixiert werden. Überschüssige Pikrinsäure wird mit Ethanol-Wasser-Lösungen herausgewaschen, um eine Anfärbbarkeit des Präparats langfristig zu gewährleisten. Eine Lagerung Bouin-fixierter Gewebe sollte dementsprechend in einer Ethanol-Wasser-Lösung erfolgen.
Mit Einschränkungen kann aus Bouin-fixierten Geweben DNA für eine Polymerasekettenreaktion oder RNA für eine RT-PCR extrahiert werden.[6][7] Für eine Immunfärbung ist bei Bouin-fixierten Geweben aufgrund des enthaltenen Formaldehyds oftmals eine Antigendemaskierung notwendig.[8]
Alternativ kann anstatt der Bouin-Lösung auch eine Fixierung mit Kupfersalzen nach Hollande oder mit Quecksilbersalzen durchgeführt werden, z. B. mit B5 oder nach Zenker.[9]
Abwandlungen
Die Gendre-Lösung ist eine alkoholische Variante der Bouin-Lösung, bei der die gesättigte Pikrinsäure-Lösung mit einer alkoholischen Lösung hergestellt wird. Dadurch werden Polysaccharide wie Glykogen im Präparat erhalten.
Die Hollande-Lösung enthält zusätzlich Kupfer(II)-acetat, welches die Zellmebran von Erythrozyten und die Granula von Eosinophilen und endokrinen Zellen erhält.
Geschichte
Die Bouin-Lösung wurde 1897 von Pol Bouin entwickelt.[10]
Einzelnachweise
- ↑ a b c d Datenblatt Bouin’s solution, bei Sigma-Aldrich (PDF).
- ↑ Freida L. Carson, Christa Hladik: Histotechnology: A Self-Instructional Text. 3. Auflage. American Society for Clinical Pathology Press, Hong Kong 2009, ISBN 978-0-89189-581-7, S. 19.
- ↑ Invertebrate Animals - Collection and Preservation. 1. Auflage. British Museum (Natural History), UK 1979, ISBN 0 521 296773(?!), S. 128.
- ↑ J. M. French: Imaging and morphology in reproductive toxicology - Progress to date and future directions. In: Reproductive toxicology (Elmsford, N.Y.). [elektronische Veröffentlichung vor dem Druck] März 2014, ISSN 1873-1708. doi:10.1016/j.reprotox.2014.03.008. PMID 24681297.
- ↑ Theory and Practice of Histology Techniques. 6. Auflage. Churchill Livingstone Elsevier, China 2008, ISBN 978-0-443-10279-0, S. 72.
- ↑ I. Hostein, I. Soubeyran, H. Eghbali, S. de Resende, M. Longy, P. Soubeyran: Polymerase chain reaction diagnosis of t(14;18) from paraffin-embedded tissues fixed with Holland Bouin fluid. In: Diagnostic molecular pathology : the American journal of surgical pathology, part B. Band 7, Nummer 3, Juni 1998, S. 184–188, ISSN 1052-9551. PMID 9836076.
- ↑ A. Gloghini, B. Canal, U. Klein, L. Dal Maso, T. Perin, R. Dalla-Favera, A. Carbone: RT-PCR analysis of RNA extracted from Bouin-fixed and paraffin-embedded lymphoid tissues. In: The Journal of molecular diagnostics : JMD. Band 6, Nummer 4, November 2004, S. 290–296, ISSN 1525-1578. doi:10.1016/S1525-1578(10)60524-7. PMID 15507667. PMC 1867484 (freier Volltext).
- ↑ A. V. Bassarova, A. A. Popov: Immunohistochemical detection of p53–effect of fixation and methods of antigen retrieval. In: Folia histochemica et cytobiologica / Polish Academy of Sciences, Polish Histochemical and Cytochemical Society. Band 36, Nummer 3, 1998, S. 127–132, ISSN 0239-8508. PMID 9773296.
- ↑ G. Baloglu, A. Haholu, Z. Kucukodaci, I. Yilmaz, S. Yildirim, H. Baloglu: The effects of tissue fixation alternatives on DNA content: a study on normal colon tissue. In: Applied immunohistochemistry & molecular morphology : AIMM / official publication of the Society for Applied Immunohistochemistry. Band 16, Nummer 5, Oktober 2008, S. 485–492, ISSN 1533-4058. doi:10.1097/PAI.0b013e31815dffa6. PMID 18594471.
- ↑ C. Ortiz-Hidalgo: Pol André Bouin, MD (1870-1962). Bouin's fixative and other contributions to medicine. In: Archives of pathology & laboratory medicine. Band 116, Nummer 8, August 1992, S. 882–884, ISSN 0003-9985. PMID 1497471.