„Bouin-Lösung“ – Versionsunterschied
| [gesichtete Version] | [gesichtete Version] |
Inhalt gelöscht Inhalt hinzugefügt
Ghilt (Diskussion | Beiträge) →Abwandlungen: + Geschichte | Ulanwp (Diskussion | Beiträge) 3 Vorlagen Cite Book nach Vorlage Literatur convertiert; siehe WP-Empfehlung; Fehler beseitigt | ||
| (22 dazwischenliegende Versionen von 11 Benutzern werden nicht angezeigt) | |||
| Zeile 1: | Zeile 1: | ||
Die '''Bouin-Lösung''' (auch ''Bouinsche Lösung'', ''Bouin's fluid'') ist eine Lösung, die in der Histologie zur [[Fixierung (Präparationsmethode)|Fixierung]] verwendet wird.<ref>{{ | Die '''Bouin-Lösung''' (auch ''Bouinsche Lösung'', ''Bouin's fluid'') ist eine Lösung, die in der Histologie zur [[Fixierung (Präparationsmethode)|Fixierung]] verwendet wird.<ref>{{Literatur |Autor=Freida L. Carson, Christa Hladik |Titel=Histotechnology: A Self-Instructional Text |Auflage=3 |Verlag=American Society for Clinical Pathology Press |Ort=Hong Kong |Datum=2009 |ISBN=978-0-89189-581-7 |Seiten=19}}</ref><ref>{{Literatur |Titel=Invertebrate Animals - Collection and Preservation |Hrsg=Roger J. Lincoln, John Gordon Sheals |Auflage=1 |Verlag=British Museum (Natural History) |Ort=UK |Datum=1979 |ISBN=0521296773 |Seiten=128}}</ref> | ||
== Eigenschaften == | == Eigenschaften == | ||
{{Infobox Gefahrstoffkennzeichnung | |||
| ⚫ | Bouin-Lösung besteht aus [[Pikrinsäure]] (gesättigte Lösung), 5 % (V/V) [[Essigsäure]] und 10 % (V/V) [[Formaldehyd]] in wässriger Lösung. Sie wird unter anderem zur Fixierung von | ||
| Name = * Bouin-Lösung | |||
* Bouin’s fluid | |||
| CAS = {{CASRN|37330-50-0|Q83063191|KeinCASLink=1}} | |||
| Quelle GHS-Kz = <ref name="Sigma">{{Sigma-Aldrich|Sigma|HT101128|Name=Bouin’s solution|Abruf=2017-05-25}}</ref> | |||
| GHS-Piktogramme = {{GHS-Piktogramme|05|07|08}} | |||
| GHS-Signalwort = Gefahr | |||
| H = {{H-Sätze|290|302|315|317|319|335|341|350}} | |||
| EUH = {{EUH-Sätze|-}} | |||
| P = {{P-Sätze|201|280|301+312+330|305+351+338|308+313}} | |||
| Quelle P = <ref name="Sigma" /> | |||
}} | |||
| ⚫ | Bouin-Lösung besteht aus [[Pikrinsäure]] (gesättigte Lösung, 0,04 Molar), 5 % (V/V) [[Essigsäure]] (0,9 Molar) und 10 % (V/V) [[Formaldehyd]] in wässriger Lösung. Sie wird unter anderem zur Fixierung von [[Biopsie]]n des [[Verdauungstrakt|Magen-Darm-Trakts]] und der [[Weichteilgewebe]] verwendet,<ref>{{Literatur |Autor=J. M. French |Titel=Imaging and morphology in reproductive toxicology - progress to date and future directions |Sammelwerk=Reproductive Toxicology |Band=48 |Datum=2014-09 |Seiten=37–40 |DOI=10.1016/j.reprotox.2014.03.008 |PMID=24681297}}</ref> da sie anschließend im Vergleich zu neutral gepufferter zehnprozentiger Formaldehydlösung eine kontrastreichere Färbung von [[Zellkern]]en erlauben. Die Bouin-Lösung hat einen [[pH-Wert]] zwischen 1,5 und 2. Sie ist weniger geeignet für [[elektronenmikroskop]]ische Präparate. Eine Fixierung mit Bouin-Lösung wird unter anderem vor einer [[Hämatoxylin-Eosin-Färbung]] oder einer [[Trichrom-Färbung]] verwendet. Vor einer Trichrom-Färbung werden formaldehydfixierte [[Gewebe (Biologie)|Gewebe]] meist mit Bouin-Lösung gebeizt. Die enthaltene Essigsäure lysiert [[Erythrozyt]]en, löst und [[Chelator|cheliert]] Eisen- und Calciumionen. Alternativ kann [[Ameisensäure]] verwendet werden.<ref>{{Literatur |Titel=Theory and Practice of Histology Techniques |Hrsg=John D. Bancroft, Marilyn Gamble |Auflage=6 |Verlag=Churchill Livingstone Elsevier |Ort=China |Datum=2008 |ISBN=978-0-443-10279-0 |Seiten=72}}</ref> Formaldehyd erzeugt ein [[Basophilie|basophiles]] [[Cytosol]], was jedoch durch die Pikrinsäure kompensiert wird. | ||
Ungetrocknete Gewebe sollten weniger als 24 Stunden in Bouin-Lösung fixiert werden. Überschüssige Pikrinsäure wird mit Ethanol-Wasser-Lösungen herausgewaschen, um eine Anfärbbarkeit des Präparats langfristig zu gewährleisten. Eine Lagerung Bouin-fixierter Gewebe sollte dementsprechend in einer Ethanol-Wasser-Lösung erfolgen. | Ungetrocknete Gewebe sollten weniger als 24 Stunden in Bouin-Lösung fixiert werden. Überschüssige Pikrinsäure wird mit Ethanol-Wasser-Lösungen herausgewaschen, um eine Anfärbbarkeit des Präparats langfristig zu gewährleisten. Eine Lagerung Bouin-fixierter Gewebe sollte dementsprechend in einer Ethanol-Wasser-Lösung erfolgen. | ||
Mit Einschränkungen kann aus Bouin-fixierten Geweben [[DNA]] für eine [[Polymerasekettenreaktion]] oder [[RNA]] für eine [[RT-PCR]] [[DNA-Extraktion|extrahiert]] werden.<ref>I. Hostein, I. Soubeyran, H. Eghbali, S. de Resende, M. Longy, P. Soubeyran: ''Polymerase chain reaction diagnosis of t(14;18) from paraffin-embedded tissues fixed with Holland Bouin fluid.'' In: ''Diagnostic | Mit Einschränkungen kann aus Bouin-fixierten Geweben [[DNA]] für eine [[Polymerasekettenreaktion]] oder [[RNA]] für eine [[RT-PCR]] [[DNA-Extraktion|extrahiert]] werden.<ref>I. Hostein, I. Soubeyran, H. Eghbali, S. de Resende, M. Longy, P. Soubeyran: ''Polymerase chain reaction diagnosis of t(14;18) from paraffin-embedded tissues fixed with Holland Bouin fluid.'' In: ''[[Diagnostic Molecular Pathology]]'' Band 7, Nummer 3, Juni 1998, S. 184–188. PMID 9836076.</ref><ref>A. Gloghini, B. Canal, U. Klein, L. Dal Maso, T. Perin, R. Dalla-Favera, A. Carbone: ''RT-PCR analysis of RNA extracted from Bouin-fixed and paraffin-embedded lymphoid tissues.'' In: ''The Journal of molecular diagnostics : JMD.'' Band 6, Nummer 4, November 2004, S. 290–296. {{DOI|10.1016/S1525-1578(10)60524-7}}. PMID 15507667. {{PMC|1867484}}.</ref> Für eine [[Immunfärbung]] ist bei Bouin-fixierten Geweben aufgrund des enthaltenen Formaldehyds oftmals eine [[Antigendemaskierung]] notwendig.<ref>A. V. Bassarova, A. A. Popov: ''Immunohistochemical detection of p53–effect of fixation and methods of antigen retrieval.'' In: ''Folia histochemica et cytobiologica / Polish Academy of Sciences, Polish Histochemical and Cytochemical Society.'' Band 36, Nummer 3, 1998, S. 127–132. PMID 9773296.</ref> | ||
| ⚫ | Alternativ kann anstatt der Bouin-Lösung | ||
== Abwandlungen == | == Abwandlungen == | ||
Die ''Gendre-Lösung'' ist eine alkoholische Variante der Bouin-Lösung, bei der die gesättigte Pikrinsäure-Lösung mit einer alkoholischen Lösung hergestellt wird. Dadurch werden [[Polysaccharide]] wie [[Glykogen]] im Präparat erhalten. | Die ''Gendre-Lösung'' ist eine alkoholische Variante der Bouin-Lösung, bei der die gesättigte Pikrinsäure-Lösung mit einer alkoholischen Lösung hergestellt wird. Dadurch werden [[Polysaccharide]] wie [[Glykogen]] im Präparat erhalten. | ||
Die ''Hollande-Lösung'' enthält zusätzlich [[Kupfer(II)-acetat]], | Die ''Hollande-Lösung'' enthält zusätzlich [[Kupfer(II)-acetat]], das die Zellmembran von [[Erythrozyten]] und die [[Granula]] von [[Eosinophil]]en und [[endokrin]]en Zellen erhält. | ||
== Alternativen == | |||
| ⚫ | Alternativ kann anstatt der Bouin-Lösung eine Fixierung mit Kupfersalzen nach Hollande oder mit Quecksilbersalzen durchgeführt werden, z. B. mit B5 oder nach Zenker.<ref>G. Baloglu, A. Haholu, Z. Kucukodaci, I. Yilmaz, S. Yildirim, H. Baloglu: ''The effects of tissue fixation alternatives on DNA content: a study on normal colon tissue.'' In: ''[[Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology]]'' Band 16, Nummer 5, Oktober 2008, S. 485–492. {{DOI|10.1097/PAI.0b013e31815dffa6}}. PMID 18594471.</ref> | ||
== Geschichte == | == Geschichte == | ||
Die Bouin-Lösung wurde 1897 von [[Pol Bouin]] entwickelt.<ref>C. Ortiz-Hidalgo: ''Pol André Bouin, MD (1870-1962). Bouin's fixative and other contributions to medicine.'' In: ''Archives of pathology & laboratory medicine.'' Band 116, Nummer 8, August 1992, S. 882–884 | Die Bouin-Lösung wurde 1897 von [[Pol Bouin]] entwickelt.<ref>C. Ortiz-Hidalgo: ''Pol André Bouin, MD (1870-1962). Bouin's fixative and other contributions to medicine.'' In: ''Archives of pathology & laboratory medicine.'' Band 116, Nummer 8, August 1992, S. 882–884. PMID 1497471.</ref> | ||
== Einzelnachweise == | == Einzelnachweise == | ||
<references /> | <references /> | ||
[[Kategorie: | [[Kategorie:Histologische Technik]] | ||
[[Kategorie: | [[Kategorie:Puffer (Chemie)]] | ||
[[Kategorie:Chemische Lösung]] | |||
[[en:Bouin solution]] | |||
Aktuelle Version vom 14. Oktober 2022, 23:00 Uhr
Die Bouin-Lösung (auch Bouinsche Lösung, Bouin's fluid) ist eine Lösung, die in der Histologie zur Fixierung verwendet wird.[1][2]
Eigenschaften
| Sicherheitshinweise | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Name |
| ||||||||
| CAS-Nummer | 37330-50-0 | ||||||||
| |||||||||
Bouin-Lösung besteht aus Pikrinsäure (gesättigte Lösung, 0,04 Molar), 5 % (V/V) Essigsäure (0,9 Molar) und 10 % (V/V) Formaldehyd in wässriger Lösung. Sie wird unter anderem zur Fixierung von Biopsien des Magen-Darm-Trakts und der Weichteilgewebe verwendet,[4] da sie anschließend im Vergleich zu neutral gepufferter zehnprozentiger Formaldehydlösung eine kontrastreichere Färbung von Zellkernen erlauben. Die Bouin-Lösung hat einen pH-Wert zwischen 1,5 und 2. Sie ist weniger geeignet für elektronenmikroskopische Präparate. Eine Fixierung mit Bouin-Lösung wird unter anderem vor einer Hämatoxylin-Eosin-Färbung oder einer Trichrom-Färbung verwendet. Vor einer Trichrom-Färbung werden formaldehydfixierte Gewebe meist mit Bouin-Lösung gebeizt. Die enthaltene Essigsäure lysiert Erythrozyten, löst und cheliert Eisen- und Calciumionen. Alternativ kann Ameisensäure verwendet werden.[5] Formaldehyd erzeugt ein basophiles Cytosol, was jedoch durch die Pikrinsäure kompensiert wird.
Ungetrocknete Gewebe sollten weniger als 24 Stunden in Bouin-Lösung fixiert werden. Überschüssige Pikrinsäure wird mit Ethanol-Wasser-Lösungen herausgewaschen, um eine Anfärbbarkeit des Präparats langfristig zu gewährleisten. Eine Lagerung Bouin-fixierter Gewebe sollte dementsprechend in einer Ethanol-Wasser-Lösung erfolgen.
Mit Einschränkungen kann aus Bouin-fixierten Geweben DNA für eine Polymerasekettenreaktion oder RNA für eine RT-PCR extrahiert werden.[6][7] Für eine Immunfärbung ist bei Bouin-fixierten Geweben aufgrund des enthaltenen Formaldehyds oftmals eine Antigendemaskierung notwendig.[8]
Abwandlungen
Die Gendre-Lösung ist eine alkoholische Variante der Bouin-Lösung, bei der die gesättigte Pikrinsäure-Lösung mit einer alkoholischen Lösung hergestellt wird. Dadurch werden Polysaccharide wie Glykogen im Präparat erhalten.
Die Hollande-Lösung enthält zusätzlich Kupfer(II)-acetat, das die Zellmembran von Erythrozyten und die Granula von Eosinophilen und endokrinen Zellen erhält.
Alternativen
Alternativ kann anstatt der Bouin-Lösung eine Fixierung mit Kupfersalzen nach Hollande oder mit Quecksilbersalzen durchgeführt werden, z. B. mit B5 oder nach Zenker.[9]
Geschichte
Die Bouin-Lösung wurde 1897 von Pol Bouin entwickelt.[10]
Einzelnachweise
- ↑ Freida L. Carson, Christa Hladik: Histotechnology: A Self-Instructional Text. 3. Auflage. American Society for Clinical Pathology Press, Hong Kong 2009, ISBN 978-0-89189-581-7, S. 19.
- ↑ Roger J. Lincoln, John Gordon Sheals (Hrsg.): Invertebrate Animals - Collection and Preservation. 1. Auflage. British Museum (Natural History), UK 1979, ISBN 0-521-29677-3, S. 128.
- ↑ a b Datenblatt Bouin’s solution bei Sigma-Aldrich, abgerufen am 25. Mai 2017 (PDF).
- ↑ J. M. French: Imaging and morphology in reproductive toxicology - progress to date and future directions. In: Reproductive Toxicology. Band 48, September 2014, S. 37–40, doi:10.1016/j.reprotox.2014.03.008, PMID 24681297.
- ↑ John D. Bancroft, Marilyn Gamble (Hrsg.): Theory and Practice of Histology Techniques. 6. Auflage. Churchill Livingstone Elsevier, China 2008, ISBN 978-0-443-10279-0, S. 72.
- ↑ I. Hostein, I. Soubeyran, H. Eghbali, S. de Resende, M. Longy, P. Soubeyran: Polymerase chain reaction diagnosis of t(14;18) from paraffin-embedded tissues fixed with Holland Bouin fluid. In: Diagnostic Molecular Pathology Band 7, Nummer 3, Juni 1998, S. 184–188. PMID 9836076.
- ↑ A. Gloghini, B. Canal, U. Klein, L. Dal Maso, T. Perin, R. Dalla-Favera, A. Carbone: RT-PCR analysis of RNA extracted from Bouin-fixed and paraffin-embedded lymphoid tissues. In: The Journal of molecular diagnostics : JMD. Band 6, Nummer 4, November 2004, S. 290–296. doi:10.1016/S1525-1578(10)60524-7. PMID 15507667. PMC 1867484 (freier Volltext).
- ↑ A. V. Bassarova, A. A. Popov: Immunohistochemical detection of p53–effect of fixation and methods of antigen retrieval. In: Folia histochemica et cytobiologica / Polish Academy of Sciences, Polish Histochemical and Cytochemical Society. Band 36, Nummer 3, 1998, S. 127–132. PMID 9773296.
- ↑ G. Baloglu, A. Haholu, Z. Kucukodaci, I. Yilmaz, S. Yildirim, H. Baloglu: The effects of tissue fixation alternatives on DNA content: a study on normal colon tissue. In: Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology Band 16, Nummer 5, Oktober 2008, S. 485–492. doi:10.1097/PAI.0b013e31815dffa6. PMID 18594471.
- ↑ C. Ortiz-Hidalgo: Pol André Bouin, MD (1870-1962). Bouin's fixative and other contributions to medicine. In: Archives of pathology & laboratory medicine. Band 116, Nummer 8, August 1992, S. 882–884. PMID 1497471.
