Alfonso II. d’Este (* 22. November 1533; † 27. Oktober 1597) war der älteste Sohn Ercoles II. d’Este und seiner Ehefrau Renée de France. Von 1559 bis zu seinem Tod war er als Nachfolger seines Vaters Herzog von Ferrara, Modena und Reggio.

Alfonso nahm 1566 am Feldzug seines Schwagers Kaiser Maximilian II. gegen die Osmanen teil. 1574 kandidierte er für die Krone von Polen, wurde aber nicht gewählt. Er war der Mäzen des Dichters Torquato Tasso.

Alfonso II. schloss drei Ehen:

• im Juni 1558 mit Lucrezia de’ Medici (1545–1562), einer Tochter Herzog Cosimos I. von Florenz,
• am 5. Dezember 1565 mit Barbara von Österreich (1539–1572), einer Tochter Kaiser Ferdinands I., und
• am 24. Februar 1579 mit Margherita Gonzaga (1564–1618), einer Tochter Herzog Guglielmo Gonzagas von Mantua.

Da alle drei Ehen kinderlos blieben, setzte er seinen Vetter Cesare d’Este, den Sohn seines Onkels Alfonso d’Este, Markgraf von Montecchio, zu seinem Erben ein. Papst Clemens VIII. erkannte diese Regelung wegen der außerehelichen Geburt Alfonsos von Montecchios nicht an, zog Ferrara 1598 als erledigtes Lehen ein und gliederte es dem Kirchenstaat an.